實時熒光定量pcr儀的意義是什么？我們該如何選擇實時熒光定量pcr儀？環(huán)球醫(yī)療器械網(wǎng)為您介紹實時熒光定量pcr儀。

實時熒光定量PCR （Quantitative Real-time PCR）是一種在DNA擴增反應(yīng)中，以熒光化學(xué)物質(zhì)測每次聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法。

實時熒光定量PCR 技術(shù)的主要應(yīng)用：

1、DNA 或RNA 的**定量分析：包括病原微生物或病毒含量的檢測,轉(zhuǎn)基因動植物轉(zhuǎn)基因拷貝數(shù)的檢測，RNAi 基因失活率的檢測等

2、基因表達差異分析：例如比較經(jīng)過不同處理樣本之間特定基因的表達差異(如藥物處理、物理處理、化學(xué)處理等 )，特定基因在不同時相的表達差異以及cDNA 芯片或差顯結(jié)果的確證

3、基因分型：例如SNP 檢測，甲基化檢測等。

其中Realtime PCR 常用的兩種方法分別為：Sybr green（熒光染料摻入法）

和Taqman probe （探針法）。

SYBR green法適用于：

1、靈敏度高：使用SYBR可使熒光效果增強到1000倍以上

2、通用性好,不需要設(shè)計探針,方法簡便,省時,價格低廉。

3、通用型方法，在國內(nèi)外科研中普遍使用。

4、高通量大規(guī)模的定量PCR檢測

5、專一性要求不高的定量PCR檢測。

Taqman Probe法適用于：

1、具有高適應(yīng)性和可靠性，實驗結(jié)果穩(wěn)定重復(fù)性好，特異性更高。

2、適用于擴增序列專一的體系的檢測。

3、樣品中靶基因含量過低的定量PCR檢測。

4、靶基因的特異序列較短，無論怎樣優(yōu)化引物設(shè)計條件都不能解決。

5、存在與靶基因同源的序列，在PCR中容易出現(xiàn)非特異性擴增，對特異性要求較高的定量。

6、廣泛用于人類傳染病的診斷和病原定量,在動物病原體基因的檢測,畜禽產(chǎn)品的檢驗檢疫,生物制品的鑒定。